IPTG CAS:367-93-1 Producentpris
Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranosid (IPTG) er en syntetisk analog af lactose, der er almindeligt anvendt i molekylærbiologisk forskning og bioteknologiske anvendelser.IPTG bruges primært til at inducere ekspression af gener i bakterielle systemer, hvor det tjener som en molekylær trigger til at initiere transkriptionen af målgener.
Når det tilsættes til vækstmediet, optages IPTG af bakterierne og kan binde sig til lac-repressorproteinet, hvilket forhindrer det i at blokere aktiviteten af lac-operonen.Lac-operonet er en klynge af gener involveret i laktosemetabolisme, og når repressorproteinet fjernes, udtrykkes generne.
IPTG bruges ofte sammen med lacUV5-mutantpromotoren, som er en konstitutivt aktiv version af lac-promotoren.Ved at kombinere IPTG-induktion med denne mutante promotor kan forskere opnå høje niveauer af genekspression.Dette giver mulighed for produktion af store mængder protein til oprensning eller andre downstream-applikationer.
Ud over genekspression anvendes IPTG også hyppigt i blå/hvide screeningsassays.I denne teknik er lacZ-genet typisk fusioneret til et gen af interesse, og bakterier, der med succes udtrykker dette fusionsgen, vil producere et aktivt β-galactosidaseenzym.Når IPTG tilsættes sammen med et kromogent substrat, såsom X-gal, bliver bakterier, der udtrykker fusionsgenet, blå på grund af aktiviteten af β-galactosidase.Dette muliggør identifikation og udvælgelse af rekombinante stammer, der med succes har integreret genet af interesse.
Induktion af genekspression: IPTG bruges almindeligvis til at inducere ekspressionen af målgener i bakterielle systemer.Det efterligner den naturlige inducer lactose og binder sig til lac-repressorproteinet, hvilket forhindrer det i at blokere lac-operonet.Dette muliggør transskription og ekspression af de ønskede gener.
Proteinekspression og oprensning: IPTG-induktion bruges ofte til at producere store mængder rekombinante proteiner til forskellige formål, såsom biokemiske undersøgelser, terapeutisk produktion eller strukturel analyse.Ved at bruge passende ekspressionsvektorer og IPTG-induktion kan forskere opnå høje niveauer af målproteinproduktion i bakterieværter.
Blå/hvid screening: IPTG bruges ofte i kombination med lacZ-genet og et kromogent substrat, såsom X-gal, til blå/hvide screeningsassays.lacZ-genet er typisk fusioneret til genet af interesse, og bakterier, der med succes udtrykker dette fusionsgen, vil producere et aktivt β-galactosidaseenzym.Når IPTG og det kromogene substrat tilsættes, bliver rekombinante stammer, der udtrykker fusionsgenet, blå, hvilket muliggør let identifikation og selektion.
Undersøgelse af genregulering: IPTG-induktion bruges almindeligvis i forskning til at studere reguleringen af gener og operoner, især lac-operonen.Ved at manipulere koncentrationerne af IPTG og overvåge ekspressionen af lac-operonkomponenter kan forskere undersøge mekanismerne for genregulering og rollen af forskellige faktorer eller mutationer.
Genekspressionssystemer: IPTG er en afgørende komponent i flere genekspressionssystemer, såsom de T7-promotorbaserede systemer.I disse systemer bruges lac-promotoren ofte til at drive ekspressionen af T7 RNA-polymerase, som igen transskriberer målgener under kontrol af T7-promotorsekvenser.IPTG bruges til at inducere ekspression af T7 RNA-polymerase, hvilket fører til aktivering af målgenekspression.
| Sammensætning | C9H18O5S |
| Assay | 99 % |
| Udseende | Hvidt pulver |
| CAS-nr. | 367-93-1 |
| Pakning | Lille og bulk |
| Holdbarhed | 2 år |
| Opbevaring | Opbevares køligt og tørt |
| Certificering | ISO. |
