Phenylgalactosid CAS:2818-58-8

Effekt på enzymaktivitet: Phenylgalactosid bruges almindeligvis til at måle aktiviteten af ​​enzymet β-galactosidase.Når phenylgalactosid hydrolyseres af β-galactosidase, frigiver det p-nitrophenol.Akkumuleringen af ​​p-nitrophenol kan måles kvantitativt, hvilket giver indsigt i aktiviteten af ​​β-galactosidase.Denne effekt udnyttes i applikationer som enzymassays og screeningssystemer.

Genekspressionsanalyse: Phenylgalactosid bruges ofte som et substrat i molekylærbiologiske eksperimenter til at studere genekspression.lacZ-genet, som koder for β-galactosidase, er almindeligvis fusioneret med regulatoriske sekvenser af andre gener af interesse.Ekspressionen af ​​lacZ-genet og hydrolysen af ​​phenylgalactosid med β-galactosidase kan indikere ekspressionsmønsteret og niveauet af det målgen, der undersøges.

Screeningssystemer: Phenylgalactosid er en vigtig komponent i screeningssystemer, der gør brug af β-galactosidaseaktivitet.Et almindeligt kendt eksempel er den blå-hvide screeningsmetode, som bruges til at identificere rekombinante eller transformerede celler i molekylærbiologiske eksperimenter.Kolonier, der med succes har optaget det rekombinante DNA eller gennemgået genetisk rekombination, vil udtrykke β-galactosidase, hvilket fører til hydrolyse af phenylgalactosid og dannelsen af ​​en blå farve.

Proteinoprensning: I nogle tilfælde kan phenylgalactosid bruges som en ligand til affinitetschromatografi til at oprense proteiner, der specifikt binder til eller aktiveres af β-galactosidase.Proteinet af interesse kan have et affinitetsmærke eller et fusionsmærke, der indeholder et β-galactosidase-bindende domæne.Ved at lede proteinblandingen gennem en søjle med immobiliseret phenylgalactosid kan det ønskede protein selektivt tilbageholdes og efterfølgende elueres.